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Protein G是一種分離自G Streptococci的細胞壁蛋白，它可通過其Fc片段結合哺乳動物IgG。
重組protein G含有高親和結合位點，減少了非特異性吸附。
Protein G和Protein A有不同的lgG結合特性，相比Protein A， Protein G對牛、羊、馬等多克隆抗體有更強的結合力，
它還可以結合不能與Protein A很好結合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1，具體結合能力見表2。
Protein A和Protein G對不同抗體的結合能力
種屬 | 亞型 | Protein A 結合力 | Protein G 結合力 |
Human | IgA | varible | — |
IgD | — | — | |
IgE | — | — | |
IgG1 | ++++ | ++++ | |
IgG2 | ++++ | ++++ | |
IgG3 | — | ++++ | |
IgG4 | ++++ | ++++ | |
IgGM | varible | — | |
Avian egg yolk | IgY | — | — |
Cow |
| ++ | ++++ |
Dog |
| ++ | + |
Goat |
| — | ++ |
Guinea pig | IgG1 | ++++ | ++ |
IgG2 | ++++ | ++ | |
Hamster |
| + | ++ |
Horse |
| ++ | ++++ |
Koala |
| — | + |
Liama |
| — | + |
Monkey(rhesus) |
| ++++ | ++++ |
Mouse | IgG1 | + | ++++ |
IgG2a | ++++ | ++++ | |
IgG2b | +++ | +++ | |
IgG3 | ++ | +++ | |
IgM | variable | — | |
Pig |
| +++ | +++ |
Rabbit | no distinction | ++++ | +++ |
Rat | IgG1 | — | + |
IgG2a | — | ++++ | |
IgG2b | — | ++ | |
IgG3 | + | ++ | |
Sheep |
| +/- | ++ |
++++=結合能力強; ++=結合能力中等; —=結合能力弱或沒有結合
問題及解決方案
問題 | 原因分析 | 推薦解決方案 |
柱子反壓過高 | 篩板被堵塞 | 清洗或更換篩板 |
填料被堵塞 | 按照第3部分進行樹脂清洗 | |
裂解液中含有微小的固體顆粒，建議上柱前使用濾膜 (0.22或0.45μm) 過濾，或者離心去除。 | ||
樣品流速過低 | 樣品或緩沖液中有氣泡 | 去除樣品或柱子中的氣泡 |
樣品和緩沖液進行脫氣 | ||
洗脫組分中沒有目的蛋白 | 樣品中抗體濃度太低 | 使用其抗原做配體的介質 |
抗體被降解 | 適當的提高洗脫pH； 將樣品脫鹽或透析到合適的Buffer中 | |
樣品與Protein G結合能力較弱 | 更換介質，如rProtein A Beads進行純化 | |
回收率逐漸減低 | 上樣量太多 | 減少上樣量 |
柱子太臟，載量降低 | 按照第3部分進行樹脂CIP清洗 |
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| KPL01-C005 | KANEKA KanCap?? L Pre - packed column NEW | 5 mL | 10744 | kaneka |
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| KPL01-S600 | KANEKA KanCap?? L Robocolumn (available soon) | 600 µL | 13260 | kaneka |
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