ACCUTASE 細胞消化液 AT104——上海起發(fā)現(xiàn)貨

細胞分離會影響體外培養(yǎng)細胞的表面蛋白和細胞表型，所以選擇合適的細胞分離方法是至關(guān)重要的。我們分離貼壁細胞常用的方法是蛋白酶消化，如胰酶消化，但是在胰酶消化的過程中大部分表面蛋白和細胞外基質(zhì)成分都會受損，而且過度酶解不僅會影響表面marker的分析，還會降低細胞活力，尤其是干細胞的活力。因此，出現(xiàn)了這款胰酶替代物——Accutase。

Accutase是一種含有蛋白水解和膠原溶解酶的細胞分離溶液，而且這些酶既不是哺乳動物也不是細菌衍生的，因此它是不含任何動物或細菌來源的，是胰蛋白酶-EDTA消化液的替代品，可以應(yīng)用于多種干細胞的培養(yǎng)及消化傳代、海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)、神經(jīng)干細胞培養(yǎng)等。由于Accutase較為溫和，分離后的細胞能保持完好的表面抗原，因此在分離細胞系以進行持續(xù)細胞培養(yǎng)、細胞表面標志物分析、病毒生長測定、細胞凋亡、細胞增殖和腫瘤細胞遷移測定方面非常有效。

1. 同時具備蛋白酶和溶膠原活性，適合大部分細胞的消化，應(yīng)用范圍更為廣泛；

2. 消化更溫和，不會破壞細胞表面抗原，能夠維持細胞最大的活力；

3. 不需清洗或中和反應(yīng)，加入培養(yǎng)基即可使Accutase酶失活，節(jié)省細胞傳代時間

產(chǎn)品描述

Accutase是包含有蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿和粘附培養(yǎng)器皿中消化細胞。適用于組織解離和細胞分離，因分離后的細胞能保持完好的表面抗原，且不含任何動物或者細菌來源組分，可滿足對后續(xù)如細胞表面標記、病毒生長分析、流式細胞分析以及生物反應(yīng)器相關(guān)檢測等多種實驗的要求。

與傳統(tǒng)的胰酶消化液相比，本品具有以下優(yōu)勢：

1）適用于絕大多數(shù)原代細胞和哺乳動物細胞系的消化，以及昆蟲細胞；

2）溫和有效的消化干細胞（hESCs和mESCs），凍存后細胞具更高復(fù)蘇率；

3）幾分鐘內(nèi)實現(xiàn)粘附細胞的分離，不需清洗或中和反應(yīng)，節(jié)省細胞傳代時間；

4）對細胞消化較為溫和，能增加細胞產(chǎn)量和存活率；增強細胞貼壁效率；改善細胞形態(tài)和細胞生長特性等。

本品為即用型的無菌產(chǎn)品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚紅），比活力≥200 u/mL，可直接用于細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗。

運輸和保存方法

冰袋運輸。收到后請于-20 ℃保存，有效期2年。2~8 ℃保存，有效期2個月。

注意事項

1）Accutase融化后4 ℃保存，至少2個月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量，放到-80℃凍存，至少6個月穩(wěn)定。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3）本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法

1. 4 ℃或冰浴融解Accutase，之后進行分裝保存。

【注】：不可37 ℃融化本品，否則會影響酶活。

2. 使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤洗細胞一次；

3. 以無菌操作的方式，按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細胞；

4. 重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)，消化5-10 min；

【注】：消化時間可自行調(diào)整。大部分細胞處于Accutase中高達1小時，對細胞狀態(tài)無影響。

5. 消化結(jié)束后，輕輕敲擊培養(yǎng)皿，使細胞與皿底部脫離，依照常規(guī)操作進行細胞計數(shù)和傳代。

【注】：不需另做清洗和酶活終止步驟。